核心需求：精準(zhǔn)檢測特定基因的 SNV、Indel、融合（如 EGFR、ALK、ROS1），需關(guān)注試劑盒的 “靶向基因覆蓋范圍"“低頻突變靈敏度"。

匹配參數(shù)：優(yōu)先選擇靶向 Panel 試劑盒（如 TruSight Oncology 500），其覆蓋 523 個(gè)腫瘤相關(guān)基因，針對 0.5% 等位基因頻率（VAF）的突變檢出率達(dá) 98%，假陽性率＜0.1%，適合實(shí)體瘤靶向治療前的驅(qū)動(dòng)基因篩查；若需同時(shí)檢測 DNA 與 RNA 變異（如融合基因），需確認(rèn)試劑盒是否支持 “DNA-RNA 聯(lián)合分析"（TSO500 可同時(shí)處理 DNA 與 RNA 樣本，無需額外采購 RNA 專用試劑盒）。

核心需求：全面覆蓋基因組或外顯子區(qū)域，檢測所有類型變異（SNV、Indel、CNV、結(jié)構(gòu)變異），需關(guān)注 “覆蓋度均勻性"“PCR 偏差控制"。

匹配參數(shù)：選擇全基因組試劑盒（如 TruSeq DNA PCR-Free），其采用無 PCR 擴(kuò)增設(shè)計(jì)，避免高 GC 區(qū)域擴(kuò)增偏差，在啟動(dòng)子、重復(fù)序列等挑戰(zhàn)性區(qū)域的覆蓋度 CV 值＜8%，適合腫瘤基因組突變圖譜構(gòu)建、罕見變異挖掘；若僅需外顯子區(qū)域分析，可搭配 Illumina Exome Capture 探針，降低測序成本（外顯子區(qū)域僅占基因組 3%，測序數(shù)據(jù)量減少 90%）。

核心需求：檢測血漿中微量 ctDNA（VAF 常＜1%），需關(guān)注 “靈敏度"“樣本用量"“抗干擾能力"。

匹配參數(shù)：優(yōu)先選擇 ctDNA 專用試劑盒（如 TruSight Oncology 500 ctDNA v2），其基于 UMI 分子標(biāo)簽技術(shù)，對 0.2% VAF 的 SNV 檢出率≥95%，僅需 4mL 血漿（提取 20ng cfDNA），且能通過試劑優(yōu)化去除血漿中血紅蛋白、游離 RNA 等干擾物質(zhì)，適合結(jié)直腸癌、肺癌等癌癥的療效監(jiān)測或復(fù)發(fā)預(yù)警。

樣本痛點(diǎn)：DNA 易因甲醛固定導(dǎo)致交聯(lián)、斷裂，RNA 易降解，傳統(tǒng)試劑盒檢出率下降 20%-30%。

適配試劑盒：選擇支持 FFPE 樣本的試劑盒，如 TSO500 配備 TruSeq FFPE DNA Repair Mix，可修復(fù) DNA 交聯(lián)（修復(fù)效率達(dá) 80%），RNA 用量僅需 40-80ng，且對降解 RNA（RIN 值≥2.0）仍有較好兼容性；避免選擇對樣本質(zhì)量要求高的試劑盒（如部分全基因組試劑盒需完整 DNA，不適用于嚴(yán)重降解的 FFPE 樣本）。

樣本痛點(diǎn)：ctDNA 含量極低（通常＜10ng/mL），含大量正常 cfDNA 干擾，需試劑盒具備高富集效率。

適配試劑盒：ctDNA 專用試劑盒（如 TSO500 ctDNA v2）通過 “靶向捕獲 + UMI 去重" 雙重策略，富集腫瘤相關(guān)基因片段（捕獲效率＞90%），同時(shí)去除正常 cfDNA 背景，且樣本用量僅 4mL 血漿，適合臨床小樣本場景；若使用普通全基因組試劑盒（如 TruSeq DNA PCR-Free），需額外增加測序深度（達(dá) 5000× 以上），成本會(huì)增加 3-5 倍，且低頻突變檢出率仍低于專用試劑盒。

樣本痛點(diǎn)：DNA/RNA 總量極少（單細(xì)胞 RNA 僅 10-30pg），需試劑盒具備 “低樣本用量"“高擴(kuò)增效率" 特性。

適配試劑盒：選擇低起始量試劑盒，如 Illumina Single Cell RNA Prep Kit，可從 1 個(gè)單細(xì)胞中構(gòu)建 RNA 文庫，起始 RNA 用量低至 1pg，且通過低偏差擴(kuò)增技術(shù)（擴(kuò)增效率＞95%），避免基因表達(dá)偏差；若使用常規(guī) RNA 測序試劑盒（如 TruSeq RNA Exome），需至少 100ng RNA，無法滿足珍貴樣本需求。

平臺(tái)選擇：NextSeq 550、MiSeq 系列（通量適中，運(yùn)行時(shí)間短）。

試劑盒匹配：選擇適配中低通量平臺(tái)的試劑盒，如 TSO500 在 NextSeq 550 上單次可處理 8-36 個(gè)樣本，300-cycle 試劑盒數(shù)據(jù)產(chǎn)出量達(dá) 39GB，滿足每個(gè)樣本 1000× 測序深度需求；若選擇 NovaSeq X 系列（單次最多處理 960 個(gè)樣本），會(huì)導(dǎo)致平臺(tái)資源閑置，單次實(shí)驗(yàn)成本增加 5-10 倍。

平臺(tái)選擇：NovaSeq 6000、NovaSeq X 系列（高通量，單位樣本成本低）。

試劑盒匹配：選擇支持高通量樣本 multiplexing 的試劑盒，如 TruSeq DNA PCR-Free 配備 96 個(gè) UD 雙索引，可在 NovaSeq X 系列上同時(shí)處理 96 個(gè)樣本，每個(gè)樣本測序成本較 NextSeq 550 降低 60%；且 NovaSeq X 系列運(yùn)行時(shí)間縮短 40%（300-cycle 運(yùn)行僅需 28 小時(shí)），適合大規(guī)模腫瘤隊(duì)列研究（如 100 例以上樣本的 TMB 分析）。

平臺(tái)選擇：NovaSeq 6000（支持 2×300bp 讀長）。

試劑盒匹配：選擇支持長讀長的試劑盒，如 Illumina TruSeq Long Read Kit，可構(gòu)建 3-5kb 文庫，配合 2×300bp 讀長，能檢測 50bp 以上的大 Indel 或結(jié)構(gòu)變異；若使用常規(guī) 2×150bp 讀長試劑盒（如 TSO500），無法完整覆蓋長片段變異，易導(dǎo)致結(jié)構(gòu)變異漏檢。

策略：選擇 “定向檢測 + 中低深度" 組合，如使用 TSO500 檢測核心驅(qū)動(dòng)基因（如 EGFR、KRAS），測序深度設(shè)為 500×（而非 1000×），數(shù)據(jù)量減少 50%，成本降低 40%，且仍能滿足 0.5% VAF 突變的檢出需求；同時(shí)通過上海易匯生物的期貨定制服務(wù)，提前 30-60 天鎖定試劑盒產(chǎn)能，

策略：優(yōu)先保證 “數(shù)據(jù)可靠性"，選擇臨床級(jí)質(zhì)控試劑盒，如 TSO500 ctDNA v2 通過 FDA/CE-IVD 認(rèn)證，批次間數(shù)據(jù)偏差＜2%，適合用于臨床療效監(jiān)測數(shù)據(jù)的發(fā)表；雖然單樣本成本較普通試劑盒高 30%，但可避免因數(shù)據(jù)不可靠導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)重復(fù)（重復(fù)實(shí)驗(yàn)成本通常是初始成本的 2-3 倍）。

實(shí)驗(yàn)需求：檢測 FFPE 樣本中 EGFR、ALK、ROS1、BRAF 等基因的 SNV、Indel、融合，突變檢出下限 0.5% VAF，樣本量有限（僅 1 片 5μm FFPE 切片，提取 DNA 約 40ng、RNA 約 60ng）。

參數(shù)匹配：

樣本兼容性：需支持 FFPE 樣本，DNA 用量≤40ng、RNA 用量≤80ng（TSO500 符合，DNA 用量 40ng、RNA 用量 40-80ng）；

變異檢測范圍：需覆蓋 EGFR 等驅(qū)動(dòng)基因的 SNV、Indel、融合（TSO500 覆蓋 523 個(gè)腫瘤基因，含上述基因所有變異類型）；

靈敏度：0.5% VAF 突變檢出率≥95%（TSO500 檢出率 98%，假陽性率＜0.1%）；

最終選擇：TruSight Oncology 500（DNA+RNA 聯(lián)合檢測模塊），搭配 NextSeq 550 平臺(tái)（單次處理 8 個(gè)樣本，匹配小批量篩查需求）；通過上海易匯生物現(xiàn)貨服務(wù)，當(dāng)日下單次日獲取試劑盒，避免 FFPE 樣本降解風(fēng)險(xiǎn)。

實(shí)驗(yàn)需求：每 2 周期采集患者血漿（4mL / 次），檢測 KRAS、NRAS、BRAF 的 SNV（VAF 下限 0.2%）及 TMB 值，需 6 個(gè)月內(nèi)完成 12 例患者的 4 次監(jiān)測（共 48 個(gè)樣本）。

參數(shù)匹配：

樣本類型：血漿 ctDNA，需低樣本用量（≤4mL）、高靈敏度（0.2% VAF 檢出率≥95%）（TSO500 ctDNA v2 符合，樣本 4mL、靈敏度 95%）；

通量與時(shí)間：48 個(gè)樣本分 4 批次檢測，每批次 12 個(gè)樣本，需運(yùn)行時(shí)間＜3 天（TSO500 ctDNA v2 在 NovaSeq X 系列上，48 個(gè)樣本分 12 批次，每批次運(yùn)行 28 小時(shí)，3 天內(nèi)完成）；

數(shù)據(jù)可比性：批次間 TMB 計(jì)算誤差＜5%（TSO500 ctDNA v2 臨床級(jí)質(zhì)控，誤差＜3%）；

最終選擇：TruSight Oncology 500 ctDNA v2，搭配 NovaSeq X 系列（高通量降低單位成本）；通過上海易匯生物期貨服務(wù)，提前 45 天鎖定 4 批次試劑盒產(chǎn)能，確保每批次試劑靈敏度一致，數(shù)據(jù)可比。

實(shí)驗(yàn)需求：分析新鮮冷凍黑色素瘤組織的全基因組變異（SNV、Indel、CNV、結(jié)構(gòu)變異），需覆蓋高 GC 區(qū)域（如 TERT 啟動(dòng)子），測序深度 30×，樣本量充足（提取 DNA 2μg）。

參數(shù)匹配：

覆蓋范圍：全基因組，需無 PCR 偏差（TruSeq DNA PCR-Free 無 PCR 擴(kuò)增，避免高 GC 區(qū)域偏差）；

覆蓋均勻性：挑戰(zhàn)性區(qū)域（GC＞65%）覆蓋度偏差＜10%（TruSeq DNA PCR-Free 在 GC 富集區(qū)覆蓋度 CV 值＜8%）；

樣本用量：DNA 用量≤2μg（TruSeq DNA PCR-Free 需 1μg，符合需求）；

最終選擇：TruSeq DNA PCR-Free（全基因組文庫制備試劑盒），搭配 NovaSeq 6000 平臺(tái)（30× 深度下，單樣本數(shù)據(jù)量 90GB，NovaSeq 6000 單次可處理 16 個(gè)樣本）；通過上海易匯生物現(xiàn)貨 + 期貨組合服務(wù)，先采購 2 套試劑盒完成預(yù)實(shí)驗(yàn)，再提前 30 天鎖定 14 套試劑盒用于正式實(shí)驗(yàn)，平衡進(jìn)度與成本。

案例：某實(shí)驗(yàn)室為檢測 FFPE 樣本中 1% VAF 的 KRAS 突變，選擇 TSO500 ctDNA v2（0.2% VAF 靈敏度），導(dǎo)致單樣本成本增加 50%；

優(yōu)化策略：根據(jù)突變檢出下限選擇靈敏度，1% VAF 需求可選擇 TSO500（0.5% 靈敏度），成本降低 30%，仍滿足實(shí)驗(yàn)需求；若后續(xù)需降低檢出下限，可通過上海易匯生物的定制化服務(wù)，額外采購 UMI 標(biāo)簽?zāi)K升級(jí)試劑盒，無需重新更換全套試劑。

案例：使用 TruSeq DNA PCR-Free（需完整 DNA）處理降解的 FFPE 樣本（DNA 片段＜200bp），導(dǎo)致文庫構(gòu)建失敗，浪費(fèi) 2 周實(shí)驗(yàn)時(shí)間；

優(yōu)化策略：提前檢測樣本質(zhì)量（如用 Agilent 2100 檢測 DNA 片段分布），降解樣本優(yōu)先選擇 TSO500（支持片段＜100bp 的 DNA），并通過上海易匯生物的 “樣本預(yù)評估 + 試劑試用" 服務(wù)，先獲取 1 套試用裝驗(yàn)證兼容性，再批量采購。

案例：僅需檢測 8 個(gè)樣本，卻選擇 NovaSeq X 系列（單次最少處理 32 個(gè)樣本），導(dǎo)致 24 個(gè)樣本位閑置，成本增加 3 倍；

優(yōu)化策略：根據(jù)樣本量選擇平臺(tái)，8 個(gè)樣本優(yōu)先用 NextSeq 550，若未來樣本量可能增加，可通過上海易匯生物的 “靈活批次" 期貨服務(wù)，先鎖定 NextSeq 550 試劑，后續(xù)樣本量達(dá)標(biāo)后再切換至 NovaSeq X 系列，避免平臺(tái)資源浪費(fèi)。