Q33226——Thermo Qubit4 熒光計（Qubit 4 Fluorometer）用戶指南

——精準、高效、多功能的核酸與蛋白質(zhì)定量解決方案

一、產(chǎn)品概述

Qubit 4 熒光計（貨號：Q33226）是賽默飛世爾科技（Thermo Fisher Scientific）推出的新一代臺式熒光定量儀，專為精準測量DNA、RNA和蛋白質(zhì)濃度設(shè)計。其核心參數(shù)如下：

• 檢測范圍：10 pg/μL DNA、12.5 μg/mL 蛋白質(zhì)（1 μL樣本量）

• 檢測時間：<3秒/樣本（DNA/RNA/蛋白質(zhì)），<5秒/RNA完整性（RNA IQ法）

• 動態(tài)范圍：5個數(shù)量級

• 光源：藍光LED（470 nm）、紅光LED（635 nm）

• 激發(fā)/發(fā)射濾光片：藍光（430–495 nm激發(fā)，510–580 nm發(fā)射）、紅光（600–645 nm激發(fā)，665–720 nm發(fā)射）

• 檢測器：光電二極管（300–1000 nm）

• 顯示與存儲：5.7英寸彩色觸摸屏，最多存儲1000個樣本數(shù)據(jù)

• 連接性：USB、WiFi、U盤

二、技術(shù)優(yōu)勢

1. 高靈敏度與特異性

• 熒光染料：僅與目標分子（DNA、RNA、蛋白質(zhì)）結(jié)合后發(fā)射熒光，避免游離核苷酸或降解核酸的干擾。

• 低濃度檢測：可精確檢測低至10 pg/μL的DNA和12.5 μg/mL的蛋白質(zhì)，適用于珍貴或低濃度樣品。

2. 快速與便捷

• RNA IQ法：5分鐘內(nèi)完成RNA完整性和質(zhì)量檢測，較傳統(tǒng)微流體芯片法（如Agilent 2100）縮短85%時間。

• 操作簡化：僅需將樣品加入工作液，混合后放入儀器檢測，無需復(fù)雜預(yù)處理。

3. 多功能與擴展性

• 內(nèi)置試劑計算器：自動計算所需染料和緩沖液用量，減少人為誤差。

• 個性化檢測：支持MyQubit軟件自定義檢測程序，可定量膽固醇、葡萄糖等小分子。

4. 數(shù)據(jù)管理與導(dǎo)出

• 多語言界面：支持中、英、法、德等7種語言。

• 數(shù)據(jù)傳輸：通過USB、WiFi或U盤導(dǎo)出數(shù)據(jù)，兼容Thermo Fisher Connect云平臺。

三、操作指南

（一）實驗前準備

1. 設(shè)備檢查

• 確保儀器放置在平穩(wěn)、干燥的臺面上，避免陽光直射。

• 檢查電源適配器、USB驅(qū)動器（4 GB）、屏幕擦拭布是否齊全。

2. 試劑準備

• 使用Qubit試劑盒（如dsDNA HS、RNA IQ等），按說明書稀釋工作液。

• 確保試劑在有效期內(nèi)（6個月內(nèi)），且避光保存。

3. 樣本準備

• DNA/RNA/蛋白質(zhì)樣本需純化，避免鹽類、酚類等抑制劑干擾。

• 樣本量建議1–20 μL，濃度超出范圍時可稀釋后檢測。

（二）實驗操作

1. 開機與預(yù)熱

• 連接電源適配器，按下電源鍵，預(yù)熱時間<35秒。

2. 選擇檢測程序

• 觸摸屏選擇對應(yīng)試劑盒類型（如dsDNA HS、RNA IQ）。

• 如需自定義檢測，使用MyQubit軟件創(chuàng)建.qbt文件并上傳。

3. 樣本檢測

• 將樣本加入工作液，混合后轉(zhuǎn)移至Qubit檢測管。

• 將檢測管放入儀器，點擊“Read Tube"，3–5秒后顯示結(jié)果。

4. 數(shù)據(jù)記錄與導(dǎo)出

• 結(jié)果顯示濃度值（ng/μL或μg/μL）及質(zhì)量評分（如RNA IQ#）。

• 通過USB或WiFi導(dǎo)出數(shù)據(jù)至Excel或Thermo Fisher Connect。

（三）實驗后維護

1. 清潔與消毒

• 使用屏幕擦拭布清潔觸摸屏，避免液體接觸儀器內(nèi)部。

• 檢測管可高壓滅菌或75%乙醇消毒。

2. 長期存放

• 長期不使用時，關(guān)閉電源并覆蓋防塵罩。

四、使用技巧與高效操作

1. 樣本優(yōu)化

• DNA/RNA：建議濃度范圍10–1000 pg/μL（DNA）或0.5–1.5 μg/μL（RNA）。

• 蛋白質(zhì)：使用BCA法或Bradford法預(yù)估濃度，避免過高導(dǎo)致熒光淬滅。

2. RNA完整性檢測

• RNA IQ法區(qū)分完整RNA（RNA IQ# >7）與降解RNA（RNA IQ#<4），適用于qPCR或NGS實驗前的質(zhì)量評估。

3. 多通道檢測

• 可同時運行多個檢測程序（如dsDNA HS與RNA IQ），提高通量。

五、注意事項

1. 安全規(guī)范

• 避免接觸熒光染料，如不慎接觸，立即用大量清水沖洗。

• 儀器僅供科研使用，不可用于臨床診斷。

2. 操作細節(jié)

• 確保檢測管無氣泡，否則可能導(dǎo)致讀數(shù)偏低。

• 避免在高溫或高濕環(huán)境下使用，可能影響熒光信號。

3. 故障排除

• 結(jié)果異常：檢查試劑是否過期、樣本是否稀釋過度。

• 儀器無響應(yīng)：重啟儀器，如仍無法解決，聯(lián)系技術(shù)支持。

六、用戶評價與支持

• 用戶反饋：

• “Qubit 4的RNA IQ法顯著縮短了RNA質(zhì)量評估時間，為NGS實驗節(jié)省了大量成本。"

• “內(nèi)置試劑計算器極大減少了人為誤差，適合高通量實驗室。"